Plateforme

Cytométrie en flux

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La plateforme de Cytométrie en flux permet l’analyse multiparamétrique de différentes populations de cellules ou particules ayant des caractéristiques physiques spécifiques.

Certains appareils permettent également de faire un tri, c’est-à-dire de séparer physiquement des sous-populations de cellules selon des critères définis : les cellules ainsi isolées (purifiées) peuvent alors servir pour d’autres types d’expériences.

Contact
Annie Gosselin
Téléphone (bureau)
(514) 343-6111, p. 8094
Télécopieur
(514) 343-7780
Courriel
annie.gosselin.2@umontreal.ca

Services offerts :

  • Tri stérile de cellules : 1 à 4 voies, en tubes, en plaques ou sur lames
  • Tri de niveau NC2+ incluant du tri de cellules humaines
  • Formation disponible à l’acquisition et l’analyse
  • Acquisition/analyse avec supervision de l’opérateur
  • Acquisition/analyse sans supervision après formation
  • Acquisition avec module haut débit (plaques 96 et 384 puits)
  • Accès à une station d’analyse munie des logiciels DiVa, FlowJo, FCS Express3, ModFit LT, ForeCyt
  • Conseils en matière de choix de fluorochromes et de protocoles
  • Consultation dans l’élaboration de nouvelles applications technologiques

Note : l’exploitation de notre système de tri de cellules est limitée au personnel de la plateforme de Cytométrie en flux.

Équipement

Analyseur de cellules BD FACS Celesta

  • Le Celesta est équipé de 3 lasers qui permettent de détecter jusqu’à 14 paramètres et 12 fluorochromes, ainsi que d’un module pour le criblage à haut débit (HTS) en plaques de 96 et 384 puits.
  • Laser bleu 488 nm : 5 détecteurs PMT (SSC + 4 fluorochromes*) et photodiode pour détection de FSC.
    Possibilité de différentes combinaisons de 4 filtres parmi les suivants :
    750LP 780/60 (ex.: PE-Cy7)
    670LP 695/40 (ex.: PerCP, PerCP-Cy5.5, 7-AAD)
    635LP 670/30 (ex.: PE-Cy5)
    600LP 610/20 (ex.: PE-CF594, PE-TexasRed, PI)
    550LP 575/25 (ex.: PE)
    505LP 530/30 (ex.: FITC, Alexa488, GFP)
  • Laser rouge 640 nm : 3 détecteurs PMT
    750LP 780/60 (ex. : APC-Cy7)
    690LP 730/45 (ex. : Alexa700)
    670/30 (ex. : APC, Alexa647)
  • Laser violet 405 nm : 5 détecteurs PMT
    750LP 780/60 (ex. : BV786)
    655LP 670/30 (ex. : BV650)
    595LP 610/20 (ex. : BV605)
    505LP 525/50 (ex. : BV510, V500, AmCyan, Ametrine)
    450/40 (ex. : BV421, PacificBlue, V450)

En apprendre davantage sur BD FACS Celesta

Analyseur de cellules BD FACSCantoII

Le CantoII est muni de 3 lasers qui permettent de détecter jusqu’à 10 paramètres et 8 fluorochromes. L’acquisition automatisée des tubes est possible via l’option carrousel (jusqu’à 40 tubes par carrousel).

  • Laser bleu 488 nm : 5 détecteurs PMT (SSC + 4 fluorochromes*) et photodiode pour détection de FSC. *Possibilité de différentes combinaisons de 4 filtres** parmi les suivants :
    735LP 780/60 (ex. : PE-Cy7)
    655LP 670LP (ex. : PE-Cy5, PE-Cy5.5, PerCP, PerCP-Cy5.5, 7-AAD)
    556LP 585/42 (ex. : PE, PI)
    502LP 530/30 (ex. : FITC, Alexa488, GFP)
    Lecture simultanée de YFP et GFP :
    530LP 550/30 (YFP)
    500LP 510/25 (GFP)
    Lecture de mCherry (échantillons à signal intense seulement):
    556LP 605/40 (mCherry)
  • Laser rouge 633 nm : 2 détecteurs PMT*
    *Possibilité de différentes combinaisons de 2 filtres** parmi les suivants :
    735LP 780/60 (ex. : APC-Cy7)
    660/20 (ex. : APC, Alexa647)
    690LP 710/40 (ex. : Alexa700)
  • Laser violet 405 nm : 2 détecteurs PMT*
    *Possibilité de différentes combinaisons de 2 filtres** parmi les suivants :
    502LP 510/50 (ex. : BV510, V500, AmCyan, Ametrine)
    450/50 (ex. : BV421, PacificBlue, V450)
    485/22 (ex. : CFP)
    735LP 780/60 (ex. : BV786)
    690LP 710/40 (ex. : BV711)
    595LP 660/20 (ex. : BV650)
    595LP 610/20 (ex. : BV605)

En apprendre davantage sur l’analyseur de cellules BD FACSCantoll.

Analyseur de cellules Bio-Rad ZE5 (Yeti)

Le ZE5 est équipé de 5 lasers qui permettent de détecter jusqu’à 29 paramètres et 26 fluorochromes. Il est doté d’une option de lecture à haut débit (HTS) et est adaptable à la lecture d’échantillons en tubes eppendorfs, en tubes 5mL et en plaques de 96 et 384 puits. Un détecteur de petites particules (SPD) permet l’analyse de microparticules <0.3um. Le logiciel Everest peut être installé sur tout ordinateur personnel, ce qui permet de préparer à l’avance les réglages des expériences ainsi que de faire des analyses post-acquisition.

  • Laser bleu 488 nm : 7 détecteurs PMT (SSC + 6 fluorochromes), et un PMT FSC 488/10
    488/10 (SSC)
    509/24 (ex.: FITC)
    549/15 (ex.: YFP)
    583/30 (ex.: DyeCycle Orange)
    615/24 (ex.: Propidium iodide)
    670/30 (ex.: PerCP)
    710/20 (ex.: PerCP-eFluor710)
  • Laser jaune-vert 561 nm : 7 détecteurs PMT
    577/15 (ex.: PE)
    589/15 (ex.: mStrawberry)
    615/24 (ex.: Pe-TexasRed)
    640/20 (ex.: AlexaFluor610)
    670/30 (ex.: PE-Cy5)
    720/60 (ex.: PE-Cy5.5)
    750LP (ex.: PE-Cy7)
  • Laser rouge 640 nm : 3 détecteurs PMT
    670/30 (ex.: APC)
    720/60 (ex.: Alexa700)
    750LP (ex.: APC-Cy7)
  • Laser violet 405 nm : 7 détecteurs PMT, et un PMT FSC 405/10 (SPD)
    420/10 (ex.: BV421)
    460/22 (ex.: V450)
    525/50 (ex.: BV510)
    615/24 (ex.: BV605)
    670/30 (ex.: BV650)
    720/60 (ex.: BV711)
    750LP (ex.: BV786)
  • Laser UV 355 nm : 3 détecteurs PMT
    447/60 (ex.: DAPI) ou 387/11 (ex.: BUV395)
    525/50 (ex.: BUV496)
    650LP (ex.: BUV737)

En apprendre davantage sur Bio-Rad ZE5 (Yeti)

Cribleur de cellules iQue de IntelliCyt

Cet appareil possède 2 lasers et permet de détecter 6 paramètres et 4 fluorochromes. L’analyse se fait directement à partir de plaques de 96 ou 384 puits.

Caractéristiques du cribleur iQue :

  • Pas de volume mort
  • Volume minimum du prélèvement : 1ul
  • Volume minimum par puits : 10ul
  • Temps minimum d’analyse pour Plaque 96 puits : 3 minutes
  • Temps minimum d’analyse pour Plaque 384 puits : 12 minutes
  • Le logiciel ForeCyt permet de générer une heatmap des plaques pour une identification rapide des puits d’intérêt.
  • Laser bleu 488nm : 4 détecteurs (SSC + 3 fluorochromes)
    FL1 533/30 (ex. : FITC, Alexa488, GFP)
    FL2 585/40 (ex. : PE)
    FL3 670LP (ex. : PE-Cy5, PerCP-Cy5.5, PE-Cy7, 7-AAD)
  • Laser rouge 633nm : 1 détecteur
    FL4 675/25 (ex. : APC, Alexa647)

En apprendre davantage sur IntelliCyt® iQue Screener

Séparateur de cellules autoMACS

Le séparateur autoMACS permet la séparation, par sélection positive ou négative, d’une sous-population de cellules d’intérêt à l’aide des trousses de marquage avec billes magnétiques disponibles chez la compagnie Miltenyi.

Plusieurs programmes de séparation sont optimisés pour différentes applications.

  • Caractéristiques techniques :
    Programmes : 9 programmes standards
    Durée des programmes : de 2.5 à 10 minutes par ml d’échantillon
    Vitesse : 10e7 cellules / seconde par ml d’échantillon
    Capacité des colonnes : 2 x 10e8 cellules marquées et 4 x 10e9 cellules totales nucléées.

En apprendre davantage sur le séparateur de cellules autoMACS

Trieur de cellules BD FACSAria (2)

Nos deux trieurs de cellules offrent les possibilités suivantes :

  • Tri de 1 à 4 voies
  • Tri en plaques (6, 12, 24, 48, 96 ou 384 puits)
  • Tri sur lames
  • L’échantillon à trier peut être apporté dans un tube de 1ml, 5ml ou 15ml à fond conique
  • Choix de tubes de collection : 0.5 ml eppendorf, 1ml, 1.5ml eppendorf, 5ml ou 15ml à fond conique
  • Température ajustable pour la chambre des échantillons (4ºC, 20ºC, 37ºC ou 42ºC)
  • Température ajustable pour tubes de collection de 5ml ou 15ml (2ºC à 50ºC)
  • Buses de 70µm, 85 µm et 100µm
  • Tri à différentes pressions selon la taille et la fragilité des cellules
  • Trieur sous hotte biologique pour tri de matériel potentiellement infectieux et tri stérile pour mise en culture.
  • Des filtres supplémentaires pour la détection d’autres fluorochromes peuvent être disponibles.

En apprendre davantage sur le trieur de cellules BC FACSAria

Trieur de cellules BD FACSAria IIIu

Cet appareil est muni de 3 lasers, offrant la possibilité de trier les cellules sur la base de jusqu’à 14 paramètres (12 fluorochromes).

  • Laser bleu 488 nm : 5 détecteurs PMT (SSC + 4 fluorochromes) et photodiode pour détection de FSC
    690LP 695/40 (ex. : PerCP-Cy5.5)
    655LP 675/14 (ex. : PerCP)
    600LP 610/20 (ex. : Red613, YFP)
    502LP 530/30 (ex. : FITC, Alexa488, GFP)
  • Laser jaune-vert 561 nm : 5 détecteurs PMT
    735LP 780/60 (ex. : PE-Cy7)
    685LP 710/50 (ex. : PE-Cy5.5)
    630LP 670/14 (ex. : PE-Cy5, 7-AAD, mPlum)
    600LP 610/20 (ex. : mCherry, RFP, PE-TexasRed, PI)
    582/15 (ex.: PE, Tomato)
  • Laser rouge 633 nm : 3 détecteurs PMT
    735LP 780/60 (ex. : APC-Cy7)
    685LP 710/40 (ex. : Alexa700)
    660/20 (ex. : APC, Alexa647)

Trieur de cellules BD FACSAria IIu

Cet appareil est muni de 3 lasers, offrant la possibilité de trier les cellules sur la base de jusqu’à 13 paramètres (11 fluorochromes).

  • Laser bleu 488 nm : 7 détecteurs PMT (SSC + 6 fluorochromes) et photodiode pour détection de FSC
    735LP 780/60 (ex. : PE-Cy7)
    685LP 695/40 (ex. : PerCP-Cy5.5, PE-Cy5.5)
    655LP 670/14 (ex. : PE-Cy5, PerCP, 7-AAD)
    600LP 610/20 (ex. : PE-TexasRed, PI)
    556LP 575/26 (ex. : PE)
    502LP 530/30 (ex. : FITC, Alexa488, GFP)
    Possibilité de changer des filtres pour lecture simultanée de YFP et GFP :
    530LP 550/30 (YFP)
    500LP 510/25 (GFP)
  • Laser rouge 633 nm : 3 détecteurs PMT
    735LP 780/60 (ex. : APC-Cy7)
    690LP 710/40 (ex. : Alexa700)
    660/20 (ex. : APC, Alexa647)
  • Laser violet 405 nm : 2 détecteurs PMT*
    *Possibilité de différentes combinaisons de 2 filtres parmi les suivants :
    735LP 780/60 (ex. : BV786)
    690LP 710/40 (ex. : BV711)
    595LP 660/20 (ex. : BV650)
    595LP 610/20 (ex. : BV605)
    502LP 530/30 (ex. : BV510, V500, AmCyan, Ametrine)
    450/40 (ex. : BV421, PacificBlue, V450)
    485/22 (ex. : CFP)

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